Показатели местного гуморального иммунитета до и после лечения воспалительных заболеваний шейки матки и влагалища препаратом Тержинан

Шейка матки и влагалище относятся к органам, находящимся на границе внутренней среды женщины и агрессивной внешней среды. Кроме анатомических особенностей (сомкнутые половая щель и стенки влагалища, складчатость слизистой влагалища, закрытые наружный и внутренний зев, протяженность узкого цервикального канала около 3 см, складчатость его слизистой и наличие в просвете густой слизи), обеспечивающих защиту внутренней среды женщины, шейка матки обладает автономной иммунной системой. Это лимфоидные структуры и макрофаги стромальных тканей шейки матки, а также гуморальные факторы - проникающие через сосудистую стенку из крови иммуноглобулины (IgIg) классов А, М, G и местносекретируемый slgA.

Физико-химические особенности иммуноглобулиновых молекул и их иммунобиологические свойства обеспечивают защиту влагалища и шейки матки. IgIg класса М играют главную роль в реакции агглютинации, фиксации комплемента, обладают выраженными гемолитическими свойствами, высокой нейтрализующей активностью в отношении бактерий и крупных вирусов (2).

Иммуноглобулины класса G активны против бактерий, вирусов и простейших, фиксируют комплемент и играют главную роль при вторичном иммунном ответе. Иммуноглобулины этого класса в избыточном количестве блокируют макрофаги и стимулируют Т-лимфоциты-супрессоры, обеспечивают подавление первичных и вторичных иммунных реакций. Эти свойства Ig G проявляются как при гуморальном, так и при клеточном иммунитете, а также при аллергии.

Иммуноглобулинам класса А принадлежит особая роль в защите органов, стоящих на границе с внешней средой. Секреторный Ig A - это типичный иммуноглобулин слизистых оболочек. Он синтезируется плазмоцитами интерстициальной ткани желез и обладает способностью нейтрализовать вирусы т.е. служит первым противовирусным барьером. Степень защищенности слизистых оболочек коррелирует с титрами местно образующихся антител (2, 3).

Секреторная система иммуноглобулина класса А является также защитой от аутоиммунных заболеваний и новообразований. Она влияет на процессы адсорбции и адгезии микробных клеток к эпителию слизистых оболочек, чем противодействует проникновению патогенных микробов в ткани. Она защищает как Т-, так и В-систему иммунокомпетентных клеток от гиперстимуляции антигенами микробов и вирусов, которые при отсутствии Ig А более интенсивно стимулируют образование Ig E, вызывающих аллергические проявления. Специфические секреторные антитела оказывают биологическое влияние на микрофлору слизистых оболочек, чем повышают процессы изменчивости (4).

Абсолютное содержание и соотношение различных IgIg может существенно изменяться при наличии местных воспалительных процессов и изменении проницаемости сосудистой стенки. В этих случаях возрастает доля Iglg, попадающих в секрет путем транссудации из сыворотки крови.

Вредные экологические факторы, воспалительные процессы влагалища, шейки, тела матки и ее придатков, вирус папилломы человека, вирус простого герпеса тип II, раннее начало и беспорядочность половой жизни, дисгормональные состояния, травмы шейки матки при абортах и в родах существенно снижают или повреждают вышеперечисленные защитные механизмы.

Не подлежит сомнению, что возникновение и прогрессирование воспалительных заболеваний влагалища и шейки матки зависит от состояния местного гуморального иммунитета, проявляющегося в локальных клеточных и гуморальных реакциях эпителия и стромы шейки матки. Состояние местного гуморального иммунитета шейки матки после проведенной противовоспалительной терапии может служить одним из критериев эффективности лечения, а также показателем положительного или отрицательного влияния самого препарата или его компонентов на местный иммунитет шейки матки.

Целью исследования было изучение показателей местного гуморального иммунитета шейки матки до и после лечения воспалительных заболеваний шейки матки и влагалища препаратом "Тержинан".

Объект и методы обследования.

Для изучения показателей местного гуморального иммунитета нами обследовано 54 пациентки. Из них 30 страдали неспецифическими воспалительными заболеваниями шейки матки (экзо- и эндоцервициты) и влагалища - основная группа, а 24 женщины были практически здоровы (I - II степень чистоты влагалищной флоры, отсутствие «эрозий» шейки матки) — контрольная группа. Все пациентки были обследованы трижды на протяжении менструального цикла и через 3-6 дней после окончания лечения в фазе секреции.

Для исключения специфических воспалительных заболеваний использованы, кроме учета клинических признаков, данные микроскопического, бактериологического и цитологического исследования, рН-метрии влагалищного секрета и специальные методы диагностики (Полимеразная цепная реакция, ДНК-зонд, иммуноферментный, иммунофлюоресцентный анализ и др.). С целью диагностики и оценки эффективности терапии проводилась простая и расширенная кольпоскопия.

При обследовании и подборе групп для иммунологического исследования тщательно собирался анамнез. Из групп были исключены больные, перенесшие переливание крови, белков, сывороток, иммунологические заболевания, острые инфекции в течение последнего года, перенесшие лучевую терапию, введение преднизолона и других иммунодепрессантов.

В комплексной терапии воспалительных заболеваний шейки матки и влагалища мы использовали комбинированный препарат «Тержинан» (Лаборатория Бушара-Рекордати, Франция). В состав препарата входят производные имидазола - тернидазол, оказывающий трихомонацидное действие, а также активный в отношении анаэробных бактерий, в частности гарднерелл; антибиотик, действующий на пиогенную бактериальную флору влагалища - сульфат неомицина; противогрибковый антибиотик - нистатин; водорастворимый кортикостероид с местным противовоспалительным действием метасульфобензоат преднизолона, позволяющий быстро купировать в острой стадии признаки воспаления. Состав таблеток позволяет сохранить целость слизистой влагалища и физиологический уровень рН (1). Препарат «Тержинан» назначали во влагалище на ночь по 1 таблетке в течение 10 дней. Для лучшего растворения перед введением во влагалище таблетку рекомендовали смочить в небольшом количестве воды в течение 20-25 секунд.

Концентрации иммуноглобулинов (IgIg) классов А, М, G и slgA в смывах секрета из цервикального канала шейки матки определялись методом простой радиальной иммунодиффузии по Mancini et al. (1965) со стандартными отечественными антисыворотками к IgIg соответствующих классов. Отдельно ставилась реакция с антисывороткой к slgA.

Эффективность лечения оценивали на основании клинических данных, кольпоскопического исследования, данных бактериоскопии и цитологического исследования мазков из шейки матки и влагалища.

Результаты и их обсуждение.

Клиническими симптомами острого неспецифического цервицита и вагинита явились обильные слизистые и/или гноевидные выделения, зуд и жжение, неприятные ощущения во время полового акта и дизурические явления. Чаще всего мы отмечали сочетание жалоб. При осмотре шейки и влагалища выявлялись отек, гиперемия и кровоизлияния на слизистой влагалища и шейки матки, реже определялись участки изъязвления.

При кольпоскопическом исследовании верхушки расширенных капилляров на цилиндрическом и многослойном плоском эпителии видны как ярко красные точки, расположены диффузно или очагами с неровными контурами, которые после обработки 3% раствором уксусной кислоты светлеют. После проведения пробы Шиллера выявлялась характерная пестрота картины, а именно множество йоднегативных и йодпозитивных участков.

Бактериоскопия влагалищных мазков указывала на наличие у всех пациенток III и IV степени чистоты влагалищной флоры. Мазки содержали многочисленные лейкоциты, а также гистиоциты, лимфоциты и большое количество клеток слущенного эпителия слизистой влагалища. Цитологическое исследование мазков из шейки матки свидетельствовало о наличии воспалительного процесса в шейке матки. Определялись небольшими группами клетки поверхностного и промежуточного слоя, единичные клетки железистого эпителия с увеличенными в размерах ядрами. Встречались некротически измененные, дегенеративные клетки и нити фибрина, много сегментоядерных нейтрофилов, преимущественно в распаде. Иногда в мазках обнаруживались слущенные клетки железистого эпителия.

Количественное определение иммуноглобулинов во внешних секретах связано с методическими трудностями. Белковый состав секрета из цервикального канала непостоянен, и концентрация иммуноглобулинов в нем зависит от фазы менструального цикла, возраста, условий взятия пробы, наличия воспалительного процесса. Секрет из цервикального канала трудно получить существующими методами в середине менструального цикла из-за его вязкости. Секрет может быть получен в недостаточном количестве из-за распределения по стенкам шприца и наконечника, что не позволяет измерить и правильно развести его для исследования.

Для решения данной задачи нами был разработан способ получения цервикальной слизи (Удостоверение на рацпредложение № 9/87) и устройство для его осуществления (Удостоверение на рацпредложение № 564).

Наконечник для забора цервикальной слизи представляет собой металлическую трубку, на дистальном конце которой, кроме отверстия на верхушке, имеются 4 радиально расположенных боковых отверстия, что позволяет производить смыв и забор материала из крипт цервикального канала. Данная методика позволяет получить смыв с иммуноглобулинами, количество которых близко к их концентрации у стенок эпителиальных клеток, что более точно отражает состояние местного иммунитета в шейке матки. Смывы производили 1 миллилитром физиологического раствора, после чего аспират помещали в стерильную пробирку для дальнейшей гомогенизации.

Для обоснования нового метода получения цервикальной слизи были проведены исследования по изучению концентраций иммуноглобулинов и общего белка в цервикальном секрете у здоровых женщин. Изучалось влияние условий взятия цервикального секрета на концентрацию общего белка и различных классов иммуноглобулинов. Материал для исследования получали двумя способами, в одно время суток, с промежутком в 24 часа у одной и той же женщины. Это позволило исключить возможное влияние на концентрацию общего белка и иммуноглобулинов в цервикальном секрете вышеперечисленных факторов.

С указанной целью исследованы 24 пробы, полученные от 12 здоровых женщин-доноров. Концентрация общего белка в пробах определялась по методу Лоури (Р. Скоупс, 1985).

После расчета и сравнения полученных результатов был сделан вывод о том, что методом смыва в пробу попадает белка в среднем в 1,2 раза больше, чем при аспирации цервикального секрета. Это позволяет более точно и достоверно производить анализ общего количества белка и его фракций в виде иммуноглобулинов в цервикальном секрете. Кроме того, метод позволяет получать секрет для анализа в любую из фаз менструального цикла. Анализ концентраций иммуноглобулинов в пробах, полученных различными методами, позволяет утверждать, что новый метод не сказывается отрицательно на оценке состояния местного гуморального иммунитета. Концентрация slgA в смывах из цервикального канала была выше по сравнению с его концентрацией в пробах, полученных методом аспирации содержимого цервикального канала. Считаем, что это происходило вследствие вымывания секрета из крипт цервикального канала и попадания в пробу иммуноглобулинов, находящихся на поверхности эпителиальных клеток.

Таким образом, использованый в работе метод позволил более точно оценить состояние местного гуморального иммунитета шейки матки в норме и при её заболеваниях.

Результаты исследования концентраций Ig в цервикальном секрете у здоровых небеременных женщин и пациенток, страдающих неспецифическими заболеваниями шейки матки и влагалища представлены в таблице 1. Приведенные в таблице данные свидетельствуют о том, что изменения концентраций IgIg коррелируют с морфофункциональными изменениями в женской половой сфере, находящейся под влиянием эндокринной системы.

Концентрация IgIg (г/л) в цервикальном секрете у здоровых небеременных женщин и страдающих неспецифическими воспалительными заболеваниями шейки матки и влагалища (М + м).